Экологические аспекты современной биотехнологии

Протеолитические бактерии, используемые в промышленности относятся к роду Clostridium (28 штаммов из 43 выделенных), Peptococcus anaerobis (8 штаммов), к родам Bacterioides и Eubacterium (3 штамма), а также к родам, близким к Bifidobacterium. Общее количество микро­организмов, обладающих протеолитической активностью, в ме­тантенках достигает 105 кл/мл. Отмечается, что до 50 % выде­ленных бактер

ий, участвующих в метановом брожении, образуют споры. Влияние микробиологического состава поступившего в ме-тантенк субстрата на микрофлору метанового брожения хорошо видно на примере анаэробного сбраживания стоков свиноферм, в культуральной жидкости которых обнаружено до 50 % энтеробактерий Е. coli и анаэробных стрептококков. В этом опыте пер­выми развивались бактерии, обладающие амилолитической активностью, а позднее — обладающие целлюлолитической и протеолитической активностями.

Существенная роль в процессах метанового брожения принадлежит ацетогенными и водородпродуцирующим бактериям. Эти бактерии, например Syntrophobacter wolinii, превращают пропионат в ацетат, СО2, если в среде одновременно при­сутствуют водородпотребляющие бактерии. Водород образуется при окислении NADH2 с образованием NAD. Содержание водоро­да в среде зависит не только от ацетогенных бактерий, но и от водородпотребляющих метаногенов. Метаногенная система будет работать эффективно тогда, когда парциальное давление водоро­да будет низким. При этом условии углеродные соединения кон­вертируются в ацетат, СО2 и будут плохо накапливаться различные жирные кислоты. В условиях загрузки биореактора легкодеградируемым субстратом концентрация СО2 может увели­чиваться и в среде будут накапливаться пропионовая, масляная и другие органические кислоты.

В третьей фазе — метаногенной — участвуют метанобразующие бактерии. Эта группа анаэробных бактерий принадлежит к древнейшему царству живых существ — архибактериям. Строе­ние и метаболизм метанобразующих бактерий сильно отличаются от прокариот. Так, у метаногенов маленький геном — около '/з генома кишечной палочки. Исследования последних лет показа­ли, что последовательность нуклеотидов в РНК у метаногенов и у обычных бактерий существенно различаются. Энергию для роста эти бактерии получают при восстановлении наиболее окисленного соединения СО2 до наиболее восстановленного СН4. Предполагаемый путь автотрофной ассимиляции СО2 у Methano­bacterium thermoautotrophicum показан на рис. 3.

Таблица 8. Фазы метанового брожения

Биогидролиз полимеров и ацидогенез

Гидролитические ацетогенные

Комплекс оргашче- Высшие жирные кис- ских веществ лоты

Ацетогенез и дегидрогенизация Водородпродуцирующие бактерии Высшие жирные кис- На, СО2, СН3СООН

Метанобразующие бактерии

Метаногенез

На, СО2, СНзСООН

СН4, СО2

Галактозо-КНг

|Аспартат{

Оксал о ацетат

I

Малат Фумарат

Сукцинат

ATP I

Сукцинил-СоА

(С02) 1 факт°Р 420ВОСС а-кетоглутарат

Гексозофосфат

Триоэофосфат

АТР

Фосфоенолпирув ат

Пентоэофосфат

Рис. 3.

Предполагаемая схема автотрофной ассимиляции СО2 у бакте­рий Methanobacterium thermoautotrophicum

После создания Хангейтом Р. Э. в 1985 г. упрощенной техники культивирования метанобразующих бактерий удалось выде­лить 30 видов метаногенов, принадлежащих к 14 родам и 6 семействам. Некоторые представители метанобразующих бактерий приведены в табл. 11.9. По форме клеток метаногены являются кокками или палочками различных размеров и подвижности. Некоторые представители Methanobacterium и особенно Methanothrix могут образовывать даже нитеобразные клетки. Строение клеточной стенки у метаногенов отличается от таковой у обычных бактерий.

В качестве субстрата многие метаногены потребляют формиат, который трансформируют в метан:

4HCOOH-CH4+3CO2+2H2O

Таблица 9. Характеристика метанобразующих бактерий

Methanobacterium

formicum

bryantii

thermoautotrophicum Methanobrevibacterium

ruminantium

smithi

orboriphilus Methanococcus

vannielii

voltae

thermoiithotrophicus

mazei

Methanomicrobium mobile

Methanobacterium cariaci marisnigri

Methanospirillum hunga-tei

Methanosarcina barken

Methanolhrix soehngenii

Methanothermus fervidus

Палочки от длинных до ни­теобразных; в клеточной стенке содержится псевдо­муреин

Комки, короткие палочки; в клеточной стенке содер­жится псевдомуреин

Подвижные нерегулярные небольшие кокки; в клеточ­ной стенке содержатся по­липептидные субъединицы

Подвижные короткие палоч­ки и нерегулярные под­вижные небольшие кокки; в клеточной стенке содер­жатся полипептидные субъ­единицы

Подвижные небольшие не­регулярные кокки; в клеточ­ной стенке содержатся по­липептидные субъединицы Подвижные палочки; в кле­точной стенке содержатся полипептиды

Нерегулярные кокки, сгруп­пированные в пакеты; в кле­точной стенке содержатся гетерополисахариды Палочки от длинных до ни­тей; в клеточной стенке не содержится муравьиная кислота

Неподвижные палочки; в клеточной стенке содержит­ся псевдомуреин

Водород и формиат

Водород

То же

Водород и формиат

То же

Водород

Водород и формиат То же

»

Водород, метанол, метил­амин, ацетат Водород и формиат

То же

Водород и формиат

Водород, ацетат, мета­нол, метиламин

Ацетат

Водород

При переработке различных коммунальных и промышленных стоков пищевых производств основным субстратом для метаногенов является ацетат, который также превращается в метан:

СН3СООН -СН4 + СО2.

К этой группе метаногенов относятся Methanosarcina barkeri Methanococcus mazei, Methanothrix soengenii. При конверсии ацетата в метан с их помощью очень мало изменяется свобод­ная энергия субстрата (AG6 = —32 кДж), поэтому скорость их роста низка и их генерация длится не менее 10 сут.

 Скачать реферат